
DEP-Chip測定例ではDEP-Chipを使った、電気化学的DNA検出法(凝集法)と、それによるDNA濃度測定・DNA検出の他、グルコース濃度測定をご紹介しています。
初期コピー数、PCRのサイクル数の条件を変えてPCRを行い、得られたPCR産物の濃度を2種類の方法(吸光度法、電気化学的法)で測定し比較。
![DNA濃度測定2 [PCR増幅産物濃度測定値の比較]図](img/example02-2.gif)
■従来法
invA遺伝子検出例(PCR)

Total 50μlのPCR反応後、
2μlの反応液を解析。
M:50-2000 bp Ladder
■凝集法
検出結果例

■従来法
検出試薬キット例(LAMP)

Total 25μlのLAMP反応後、
1μlの反応液を解析。
M:50-2000 bp Ladder
■凝集法
検出結果例

■従来法
腸管出血性大腸菌
検出試薬キット(LAMP)

Total 25μlのLAMP反応後、
1μlの反応液を解析。
M:50-2000 bp Ladde
LAMP Condition
65℃,60min.
■凝集法
検出結果例

Template
a:Positive Control DNA
b:Negative Control
c:陽性検体1(大腸菌O157ゲノム102copy)
d:陽性検体2(大腸菌O157ゲノム103copy)
e:陰性検体2(大腸菌O18ゲノム102copy)
■従来法
GMトウモロコシ検出試薬
(LAMP)

Total 25μlのLAMP反応後、
1μlの反応液を解析。
M:50-2000 bp Ladder
LAMP Condition
65℃,60min.
■凝集法
検出結果例

Template
a:陽性コントロールプラスミド
b:トウモロコシゲノム (遺伝子組み換え体ではない)
c:D.W.
■従来法
(Nested PCR)

Total 50μlのPCR反応後、
2μlの反応液を解析。
M:50-2000 bp Ladder
Template
a:HBV患者血液1(HBV-DNA(+))
b:HBV患者血液2(HBV-DNA(++))
c:健常者血液 (HBV-DNA(-)
■凝集法
検出結果例

■従来法
(LAMP)

Total 25μlのLAMP反応後、
1μlの反応液を解析。
M:50-2000 bp Ladder
Template
a:HBV患者血液1(HBV-DNA(+))
b:HBV患者血液2(HBV-DNA(++))
c:健常者血液 (HBV-DNA(-))
■凝集法
検出結果例

グルコースオキシターゼを電極表面上にドライアップにより固定化し、クロノアンペロメトリーで測定した。
非固定の場合と比較して、電流値が高く、測定レンジが広い。